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ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)操作中可能影響結(jié)果的原因及解決辦法

2017-12-04 [1994]

ELISA試劑盒試驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在廣泛的運(yùn)用,但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)對(duì)試驗(yàn)的檢測(cè)作用影響較大,如不留意,有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等成果。遠(yuǎn)將操作中各個(gè)環(huán)節(jié)常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下。

ELISA試劑盒試驗(yàn)操作中可能影響成果的原因及解決辦法剖析:
1 挑選試劑
挑選質(zhì)量的檢測(cè)試劑,嚴(yán)格依照試劑說明書進(jìn)行操作,操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣可能原因:
1)血清或血漿標(biāo)本分離欠好即進(jìn)行加樣;
2)手工操作中,加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)刻過長(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí));
3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺起孔外。

ELISA試劑盒解決辦法:
1) 標(biāo)本為血清:將血液先天然寄存1-2小時(shí)后,再用3000rmp離心15分鐘;標(biāo)本為血漿:有必要運(yùn)用含抗凝劑的血液標(biāo)本搜集管,采血后有必要當(dāng)即倒置采血管混合5-10次,放置一段時(shí)刻后,3000rpm離心15分鐘;若在幾天內(nèi)檢測(cè),可放在2-8℃冰箱中,若要儲(chǔ)存,則置于-20℃的低溫冰箱內(nèi)。
2) 加樣后及時(shí)放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板外表輕拭吸干。
4) 如果選用AT或其他全自動(dòng)加樣,挑選FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標(biāo)本較多時(shí),請(qǐng)分批操作。
3、孵育可能原因:
1) 孵育時(shí)未貼封片或加蓋,使標(biāo)本或稀釋液蒸騰,吸附于孔壁,難于清洗*;
2) 孵育時(shí)刻人為延伸,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反響孔周圍,難以清洗*。
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