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ELISA試劑盒規(guī)范品怎么正確溶解與稀釋?

2017-12-25 [2310]

ELISA試劑盒規(guī)范曲線是結(jié)果核算的尺子,規(guī)范品是ELISA 試驗(yàn)成功與否的要害點(diǎn)。怎樣正確溶解、稀釋規(guī)范品呢?
1. 粉末規(guī)范品時(shí)間短離心,讓因運(yùn)送沾到管蓋、管壁的規(guī)范品沉到管底。
2. 依據(jù)瓶標(biāo)簽參加一定體積的蒸餾水,加水后輕柔渦旋震動(dòng),室溫靜置溶解 10-30min,讓粉末*溶解。
留意:加水后暫不必移液槍吹吸,防止蛋白未溶解,槍頭帶出部分蛋白,待*溶解后可吹吸或渦旋振動(dòng)混勻。
3. 規(guī)范品梯度稀釋:
(1)規(guī)范品稀釋液的挑選:
若血清、血漿、安排勻漿樣本,用試劑盒中的規(guī)范品稀釋液,梯度稀釋規(guī)范品。
若細(xì)胞上清樣本,主張用細(xì)胞培養(yǎng)基梯度稀釋規(guī)范品。
(2)耗材預(yù)備:預(yù)備8個(gè)1.5Ml離心管,寫上S1-S7、空白。
(3)梯度稀釋:依據(jù)說明書,每管參加等體積的規(guī)范品稀釋液(培養(yǎng)基)。汲取同體積溶解好的規(guī)范品到S1管中,吹打10次混勻,渦旋5S。從S1管中汲取同體積溶液到 S2管,吹打10次混勻,渦旋5s。同法稀釋S3-S7濃度。
(4)空白: 規(guī)范品稀釋液(培養(yǎng)基)作為空白即零濃度。
留意:梯度稀釋規(guī)范品時(shí),渦旋震動(dòng)混勻后可時(shí)間短離心,讓到蓋子、壁上的液體到管底,再開端稀釋下個(gè)濃度。
規(guī)范品溶解、梯度稀釋是ELISA試驗(yàn)要害點(diǎn),按以上方法梯度稀釋就可!
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