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豬ELISA試劑盒試驗(yàn)注意事項(xiàng)有哪些?

2019-02-27 [1281]

 一年有四個(gè)時(shí)節(jié),每個(gè)時(shí)節(jié)都有不同的風(fēng)光,而我喜歡冬天下雪時(shí)的艷麗風(fēng)光。冬天,大雪紛飛人們好象來到了一個(gè)幽雅安靜的jing界,來到了一個(gè)晶瑩透剔的童話般的世界。松的那清 香,白雪的那冰香,給人一種涼瑩瑩的勸慰。一切都在過濾,一切都在前進(jìn),連我的心靈也在凈化,變得純真而又夸姣。 
在ELISA實(shí)驗(yàn)前的留神事項(xiàng) 

 1、仔細(xì)閱讀說明書

 2、斷定試劑盒在有效期內(nèi) 

 3、按說明書斷定一切試劑*(數(shù)量、體積) 

 4、標(biāo)本制備要標(biāo)準(zhǔn),每份標(biāo)本體積要按2-3個(gè)復(fù)孔以上的量制備(貯存),盡量分裝做備份。短期內(nèi)無法實(shí)驗(yàn)者,留神低溫保存 

 5、準(zhǔn)備好一切實(shí)驗(yàn)額外所需物品,如試管、吸頭、移液器、離心機(jī)等

 6、根據(jù)檢測標(biāo)本數(shù)量斷定所需試劑的量 

 7、按說明書將所用試劑平衡至室溫,制造所需試劑 
 ELISA實(shí)驗(yàn)時(shí),留神事項(xiàng)如下: 

1.正式實(shí)驗(yàn)時(shí),應(yīng)分別以陽性對(duì)照與陰性對(duì)照操控實(shí)驗(yàn)條件,待檢樣品應(yīng)作一式二份,以確保實(shí)驗(yàn)效果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高,說明有非特異性反應(yīng),可選用羊血清、兔血清或BSA等關(guān)閉。 2.在ELISA中,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的挑選是很重要的,其間包含: 

(1)固相載體的挑選:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其方式可所以凹孔平板、試管、珠粒等?,F(xiàn)在常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載 體,在運(yùn)用前均可進(jìn)行挑選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),查詢其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附功用是否出色。 

(2)包被抗體(或抗原)的挑選:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時(shí)刻及其蛋白量也有必定影響,一般多選用4℃18 ~24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的適濃度需進(jìn)行滴定:即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后,在其它實(shí)驗(yàn)條件相一起,查詢陽性標(biāo)本的OD值。挑選OD值大而蛋白量少的 濃度。關(guān)于大都蛋白質(zhì)來說一般為1~10μg/ml。

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