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ELISA這些常見實驗方法的優(yōu)缺點

2019-04-15 [4211]

ELISA實驗是科研人員常常用到的實驗辦法。很多人覺得ELISA很簡單,其實不然。今天小編就帶我們了解下ELISA實驗的原理和常見辦法。   
 實驗原理
  1.包被:抗原/抗體,固相化
  2.反響: 1)待測抗體/抗原; 2)酶標抗原/抗體
  3.洗刷:使結合在固相上的抗原抗體復合物與未結合的分別
  4.底物顯色:定性/定量剖析 
   常用辦法
  1.間接法
  檢測抗體常用的辦法, 首要用于對病原體抗體的檢測。
  優(yōu)勢:二抗能夠加強信號,并且有多種選擇能做不同的測定剖析。不加酶符號的一級抗體則能保存它多的免疫反響性。
  缺陷:交互反響發(fā)作的機率較高
  2.雙抗體夾心法
  檢測大分子抗原常用的辦法。
  優(yōu)勢:高活絡、高專一性,抗原無須事前純化。
  缺陷:抗原必定得具有兩個以上的抗體結合部位。
  3.競爭法
  檢測小分子半抗原(藥物、激素等)。
  優(yōu)勢:可適用比較不純的樣本,并且數(shù)據(jù)再現(xiàn)性很高。
  缺陷:整體的敏感性和專一性都較差。 

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