波多野结衣作品,国产午夜精品一区二区三区嫩草,欧美性狂猛xxxxxbbbbb,中国熟妇色xxxxx中国学生

首頁 > 技術(shù)文章 > 關(guān)于ELISA試劑盒封閉問題,您了解多少?

關(guān)于ELISA試劑盒封閉問題,您了解多少?

2020-11-17 [3492]

 封閉是否必要,取決于ELISA試劑盒的模式及具體的實(shí)驗(yàn)條件。并非所有的ELISA固相均需封閉,封閉不當(dāng)反而會(huì)使陰性本底增高。一般說來,雙抗體夾心法,只要酶標(biāo)記物是高活性的,操作時(shí)洗滌*,不經(jīng)封閉也可得到滿意的結(jié)果。特別是用單抗腹水直接包被時(shí),因其中大量非抗體蛋白在包被時(shí)同樣也吸附在固相表面,業(yè)已起到了類似封閉劑的作用。但在間接法測(cè)定中,封閉一般是不可少的。包被好的ELISA板干燥后放入密封袋或錫袋中,在低溫可保存數(shù)月。
 

  包被用抗原或抗體的濃度,包被的溫度和時(shí)間,包被液的pH等應(yīng)根據(jù)試驗(yàn)的特點(diǎn)和材料的性質(zhì)而選定??贵w和蛋白質(zhì)抗原一般采用pH9.6的碳酸鹽緩沖液作為稀釋液,也有用pH7.2的磷酸鹽緩沖液及pH7~8的Tris-HCL緩沖液作為稀釋液的。通常在ELISA板孔中加入包被液后,在4-8℃冰箱中放置,37℃中保溫2小時(shí)被認(rèn)為具有同等的包被效果。包被的適當(dāng)濃度隨載體和包被物的性質(zhì)可有很大的變化,每批材料需通過實(shí)驗(yàn)與酶結(jié)合物的濃度協(xié)調(diào)選定。一般蛋白質(zhì)的包被濃度為100ng/ml-20ug/ml。

  封閉(blocking)是繼包被之后用高濃度的無關(guān)蛋白質(zhì)溶液再包被的過程。抗原或抗體包被時(shí)所用的濃度較低,吸收后固相載體表面尚有未被占據(jù)的空隙,封閉就是讓大量不相關(guān)的蛋白質(zhì)充填這些空隙,從而排斥在ELISA其后的步驟中干擾物質(zhì)的再吸附。封閉的手續(xù)與包被相類似。常用的封閉劑是0.05%-0.5%的牛血清白蛋白,也有用10%的小牛血清或1%明膠作為封閉劑的。脫脂奶粉也是一種良好的封閉劑,其特點(diǎn)是價(jià)廉,可以高濃度使用(5%)。高質(zhì)量的速溶食用低脂奶粉即可直接當(dāng)作封閉劑使用,但由于奶粉的成份復(fù)雜,而且封閉后的載體不易長期保存,因此在ELISA試劑盒的制備中較少應(yīng)用。 

亚洲一区二区三区av天堂| 丰满少妇大乳高潮在线| 双性受抽搐潮喷调教老师与学生| 雯雯被四个男人拖进工地| 国产特级毛片aaaaaa| 亚洲 欧美 自拍 第15页| 成人精品一区二区三区电影| 国产精品一区二区毛卡片| 97高清视频在线观看免费| 成人视频网站| 麻豆久久国产亚洲精品超碰热| 超大乳抖乳露双乳喷奶水视频 | h高潮嗯啊娇喘抽搐视频a片小说| 天干天干啦夜天干天2017| 国产精品乱码一区二区三区| 51精产国品一二三产区区别| 乖宝撞的你舒不舒服h| 国产最新精品sm调教视频| old欧美老妇videos | 波多野结衣 电影| 日韩精品无码一区二区中文字幕| 99国精产品一区二区三区a片| 伊人www22综合色| 国产a级毛片久久久久久精品| 欧美成人精品a片免费一区99| 女性人体图片| 久久妇女高潮喷水多长时间| 思思久久精品在热线热| 将军脔到她哭h粗话h| 国产精品久久久久久久妇| 玉蒲团夜宵魂免费观看| 亚洲人成色777777精品音频| 丰满人妻一区二区三区免费视频 | 黑帮大佬和我的365天| 女人被躁到高潮嗷嗷叫视频| xxxx日本| 欧美大浪妇猛交饥渴大叫| 亚洲av夜夜欢一区二区三区| 少妇作愛爽到呻吟69xx| 99精品人妻无码专区在线视频区| 强行挺进朋友漂亮的娇妻|