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你的還原糖檢測做對了嗎?

2021-02-20 [2263]

能夠還原斐林(H.von Fehling)試劑(本尼迪特試劑)或托倫斯(B.Tollens)試劑的糖稱為還原糖,所有的單糖(除二羥丙酮),不論醛糖、酮糖都是還原糖。大部分雙糖也是還原糖,蔗糖例外。斐林試劑是含Cu2+絡合物的溶液,被還原后得到磚紅色Cu2O的沉淀。托倫斯試劑被還原后能生成單質(zhì)銀,發(fā)生“銀鏡反應”。分子結構中含有還原性基團(如游離醛基或游離酮基)的糖,叫還原糖。如葡萄糖。果糖含有游離的酮基,所以果糖也屬于還原糖。

還原性質(zhì)

一般情況下,單糖的還原能力主要來自它的醛基,如葡萄糖,而多糖則大多因為半縮醛羥基的存在。還原后,自己會變成糖酸。如葡萄糖就會變成葡萄糖酸。如該糖是酮糖,羰基就會斷裂,分解成兩個較小的分子,如果糖。所有單糖(除二羥丙酮)及大部分二糖(除蔗糖等)在本尼迪克特試驗中呈陽性反應,所以大部分單糖及二糖都具有還原性。

還原糖直接滴定法原理

試樣經(jīng)除去蛋白質(zhì)后,以亞甲藍作指示劑,在加熱條件下滴定標定過的堿性酒石酸銅溶液(已用還原糖標準溶液標定),根據(jù)樣品液消耗體積計算還原糖含量。

還原糖滴定注意事項

一、堿性酒石酸甲、乙液與還原糖反應是定量關系,它們的多少直接影響測定結果的多少,從而影響檢測數(shù)據(jù),所以堿性酒石酸甲、乙液必須精-確吸取,保證每次取樣量一致。

影響堿性酒石酸銅甲、乙液吸取誤差的因素:

1、堿性酒石酸銅甲、乙液在吸管中刻度液面的位置要保持一致。

2、吸管外壁殘留的液體多少會造成堿性酒石酸甲、乙液取樣量的誤差,所以要習慣性的對吸管外壁的堿性酒石酸甲、乙液進行相同處理,保證每次外壁殘留液相對一致,從而減少液體取樣量的誤差。

3、堿性酒石酸銅甲、乙液放入三角瓶的速度保持一致(不可吹),放完后要觀察其殘留在吸管中有多少,要保證每次殘留一致。

4、堿性酒石酸銅甲、乙液的不是很明顯的沉淀(或濃度變化)也會對測定造成波動,取堿性酒石酸銅甲液的器具切記不要與堿性物質(zhì)接觸(同時也要注意防止帶入堿性物質(zhì)于甲液中),以避免甲液產(chǎn)生沉淀,盛甲液的容器時間長了,內(nèi)壁上也會殘留固體(硫酸銅),這些固體顆粒也會造成檢測誤差。

二、滴定速度要保持均衡一致,趁熱以每2秒一滴的速度滴定為好(速度不要受滴定時間的長短而改變)。

三、試樣溶液滴定時要進行預測,正式測定時從滴定管滴加比預測體積少1ml的試樣溶液至錐形瓶中,控制在2min中內(nèi)加熱至沸,保持沸騰以1滴/2s的速度滴定至終點。

四、電爐的溫度對檢測結果也有影響,所以要保證電爐充分預熱,同時三角瓶在電爐上的放置位置要保持一致。

五、測定時液體沸騰后的開始滴定的時間也要保持一致2min內(nèi),一般等液體充分沸騰后開始滴定。

六、滴定終點的判斷也要保持一致。等液體藍色剛好褪去為為滴定終點。

七、糖液稀釋及取樣也要注意精-確,注意吸管正確使用方法。

八、滴定過程中-好佩戴面罩和口-罩以防沸騰液體噴濺或是發(fā)生三角爆裂等。

九、注意滴定管漏液、變形,滴定管氣泡等對檢測數(shù)值的影響。

十、三角瓶使用后清洗干凈。

十一、滴定開始前可以在空白三角瓶和樣品三角瓶內(nèi)加入幾粒小顆粒玻璃珠,促進樣品受熱均勻以及防爆裂。

十二、如果溶液中還原糖含量較低,產(chǎn)生的氧化亞銅便會較少,試驗后只會有綠色、混濁的或橙色等。

十三、在酸性環(huán)境中,Cu2 會變得較為穩(wěn)定,不容易發(fā)生反應,所以不能進行試驗。

十四、醇和醛在這測試亦會產(chǎn)生磚紅色沉淀物,因為兩者都具有在這試驗中產(chǎn)生作用的官能團。
 

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