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細(xì)胞培養(yǎng)常見(jiàn)的問(wèn)題怎么決絕

2021-12-30 [2165]

細(xì)胞培養(yǎng)時(shí),培養(yǎng)基中丙酮酸鈉的作用是什么?丙酮酸鈉可以作為細(xì)胞培養(yǎng)中的替代碳源,盡管細(xì)胞更傾向于以葡萄糖作為碳源,但是,如果沒(méi)有葡萄糖的話,細(xì)胞也可以代謝丙酮酸鈉。


倒置相差顯微鏡

倒置顯微鏡一般構(gòu)造與普通顯微鏡一樣有物鏡目鏡光源光路系統(tǒng)等。但倒置顯微鏡的光源位于在載物臺(tái)上放,光線由上至下照射到觀察物上,物鏡則位于載物臺(tái)下方,觀察培養(yǎng)細(xì)胞多用放大倍數(shù)為 10×和 20×的物鏡,目鏡為 10×。


擦拭鏡頭可用沾酒精/乙混合液或二甲苯的鏡頭紙或脫脂棉。


擦拭涂漆表面,可用紗布除去灰塵。若有油漬污垢,用紗布沾少許汽油去除,不能用有機(jī)溶劑(如:酒精乙和其它稀釋劑)擦拭涂漆表面和塑料部件。


儀器不使用時(shí),用有機(jī)玻璃或聚乙烯罩上,并存放于干燥且沒(méi)有霉菌滋生的地方。


物鏡和目鏡放在有干燥劑的密閉容器中。

細(xì)胞


需要注意:


1、-80度凍存細(xì)胞的時(shí)間太長(zhǎng),一般如果需要長(zhǎng)期保存的話,超過(guò)一個(gè)月。轉(zhuǎn)入液氮。原有的凍存細(xì)胞狀態(tài)就不好,表現(xiàn)為細(xì)胞活力不夠,細(xì)胞密度不高。

換液太快,培養(yǎng)體系太大,如果細(xì)胞狀態(tài)不好,保持較小的培養(yǎng)容積,以獲得較高的細(xì)胞密度。如果培養(yǎng)基還是桃紅色,說(shuō)明細(xì)胞的代謝活動(dòng)很弱,此時(shí)不宜換液。不知道你這個(gè)細(xì)胞是喜歡聚集生長(zhǎng)還是離散生長(zhǎng)。

根據(jù)條件調(diào)節(jié)。比如,如果喜歡聚堆長(zhǎng),建議先傾斜培養(yǎng)瓶/皿,2h為一個(gè)時(shí)間間隔,觀察細(xì)胞狀態(tài),以作調(diào)整。


2、如果當(dāng)天能見(jiàn)到貼壁的話,說(shuō)明還是可以的.有時(shí)候培養(yǎng)基顏色偏紫,細(xì)胞貼壁會(huì)有問(wèn)題的.你核實(shí)一下你培養(yǎng)基顏色是否偏堿.如果偏堿,可以適當(dāng)調(diào)高培養(yǎng)箱二氧化碳的濃度.或者換新的培養(yǎng)基.特別是開(kāi)啟過(guò)的培養(yǎng)基,適用時(shí)間長(zhǎng)容易出現(xiàn)這個(gè)問(wèn)題。


3、細(xì)胞凍存過(guò)程如果出了問(wèn)題,復(fù)蘇細(xì)胞溶解要迅速,有時(shí)候水浴鍋刀38度,甚至40度,目的是讓其快速解凍,而且復(fù)蘇一次的培液血清濃度可以相對(duì)高一點(diǎn),等第二次換液時(shí)換回10%。

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