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試劑盒的參考標準您知嗎?上海研域為您分解

2022-05-16 [2291]

試劑盒的參考標準您知嗎?上海研域為您分解


我公司的技術專員表示出對ELISA試劑盒的參考標準熟知以下7項就夠了:

一、標準曲線

1.定量方法:標準曲線至少由5個濃度組成,測定次數(shù)不少于5次,以確定工作濃度范圍和IC50范圍。

2.定性方法:工作濃度范圍通過陰性、臨界值濃度和陽性的樣品測定來確定,每個濃度重復不少于5次,濃度與響應值之間應有一定的關系。


二、檢測限和定量限

1.檢測限:20份空白樣品測定均值加3倍標準差。

2.定量限:應大于標準曲線中zui低濃度點,對于定量方法,應對該濃度樣品至少測定6次進行驗證,而不能通過外延法推斷。


三、臨界值(cut-off值)的確定

對于有殘留*的藥物,檢測方法的臨界值為20份添加MRL濃度的樣品重復3次測定的均值減去1.64倍標準差,即95%置信限處,對于禁用藥物,檢測方法的臨界值為定量限,該值應達到*的指標。


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四、精密度和準確度

對于有殘留*的藥物,添加濃度為MRL及MRL上下各一個濃度;對于禁用藥物,添加濃度為定量限和2倍定量限,每個添加濃度至少測定5個平行樣,并至少進行3批實驗(不同檢測日期,不同標準曲線,不同批次試劑盒)。

1.準確度:回收率范圍大于40%或符合相應檢測標準的要求。

2.精密度:以變異系數(shù)表示

批內(nèi)變異系數(shù):每批平行樣之間的變異系數(shù)小于或等于25%,對于禁用藥物小于或等于30%.

批間變異系數(shù):所有樣品之間的變異系數(shù)值小于或等于30%,對于禁用藥物小于或等于40%.

定性方法:陰性和陽性樣品各測定不少于50份,確定假陽性率和假陰性率。


五、交叉反應

試劑盒與待檢藥物類似物、代謝物或共同存在的藥物測定交叉反應率。


六、保存期

保存期通過保存條件的穩(wěn)定性試驗結(jié)果確定。


七、復核試驗

1.定量方法:檢測限、IC50以及至少兩個添加濃度的準確度和精密度,并與理化方法(或與具代表性進口試劑盒)比較。

2.定性方法:檢測限、假陽性率和假陰性率。


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