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淺析酶聯(lián)免疫試劑盒的工作原理及其工作環(huán)境

2022-08-15 [1526]
  酶聯(lián)免疫試劑盒是酶免疫測定技術(shù)中應(yīng)用的技術(shù)。其基本方法是將已知的抗原或抗體吸附在固相載體表面,使酶標(biāo)記的抗原抗體反應(yīng)在固相表面進(jìn)行,用洗滌法將液相中的游離成分洗除。常用的ELISA法有雙抗體夾心法和間接法,前者用于檢測大分子抗原,后者用于測定特異抗體。
 
  酶聯(lián)免疫試劑盒的工作原理:
 
  促卵泡素(FSH)是動(dòng)物腦垂體分泌作用于卵巢卵泡生長、發(fā)育、分化、成熟和排卵的重要繁殖激素.由于是生物大分子,不能透過細(xì)胞膜,F(xiàn)SH必須與靶細(xì)胞膜上的促卵泡素受體(FSHR)結(jié)合,經(jīng)過受體介導(dǎo)將信息傳遞到靶細(xì)胞內(nèi),才能發(fā)揮其生物學(xué)功能.所提供的ELISAKit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒(ELISA)。預(yù)先包被的抗體為多克隆抗體。
 
  檢測相抗體也為多克隆抗體,經(jīng)生物素(biotin)標(biāo)記。樣品和生物素標(biāo)記抗體先后加入酶標(biāo)板孔反應(yīng)后,PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標(biāo)記的親和素反應(yīng);經(jīng)過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關(guān)。
 
  酶聯(lián)免疫試劑盒的工作環(huán)境:
 
  1、37℃恒溫箱。
 
  2、標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀。
 
  3、自動(dòng)洗板機(jī)。
 
  4、單通道或多通道可調(diào)節(jié)移液器以及其吸頭。
 
  5、蒸餾水,容量瓶等。
 
  6、干凈的試管和Eppendof管。
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