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上海研域生物講解小鼠ELISA雙抗體夾心法操作步驟

2024-01-10 [929]

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小鼠ELISA雙抗體夾心法

(1)包被:用包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1-10 μg/mL。在酶標板反應孔中加0.1 mL,4℃過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗板3 次,每次3 min。

(2)加樣:加一定濃度稀釋的待檢樣品(同時做空白對照,陰性對照孔及陽性對照)0.1 mL 于上述已包被的反應孔中,置濕盒中,37℃, 1 hr。用洗滌緩沖液洗板3 次,每次3 min。

(3)加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體 (經滴定后的稀釋度) 0.1ml。37℃,0.5 - 1 hr,用洗滌緩沖液洗板3 次,每次3 min。

(4)加底物液顯色:于各反應孔中加入現配的TMB 底物溶液0.1 mL,37 ℃,10 - 30min。

(5)終止反應:于各反應孔中加入終止液0.05 mL。

(6)結果判定:將酶標板在酶標儀上,于450 nm (若ABTS 顯色,讀410 nm),讀數,輸出到Excel 中。

(7)以標準品濃度為橫坐標,吸光度為縱坐標,生成標準曲線和直線回歸方程式,根據公式計算未知樣品的濃度,并記錄。

上海研域生物小鼠ELISA雙抗體夾心法采用進口材料生產,專業(yè)的酶免專家,提供免費代測,數據分析,技術服務。產品遠銷全國各地。多年以來我們以極其苛刻的要求控制產品的質量,堅持生物科學研究與世界同步的理念。

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