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血清使用中的常見問題解析

2009-07-20 [2756]

在血清使用中,常常會(huì)遇到各種問題,以下就一些常見問題進(jìn)行解答。

1.保存血清什么辦法?
我們建議血清應(yīng)保存在-5℃至-20℃。若你一次無(wú)法用完一瓶,建議您無(wú)菌分裝血清至恰當(dāng)?shù)臏缇萜鲀?nèi),再放回冷凍。

2.怎樣避免出現(xiàn)沉淀物?
我們建議您在使用血清的時(shí)候,注意正確的血清解凍步驟,并盡量避免滅活血清及長(zhǎng)時(shí)間的將血清置于高溫環(huán)境中

3.如何解凍血清才不會(huì)使產(chǎn)品質(zhì)量受損?
我們建議您將血清從冷凍箱中取出后,先置于2-8℃冰箱中使之溶解,然后在室溫下使之全溶。但必須注意的是,溶解過程中必須規(guī)則地?fù)u晃均勻。

4.血清解凍后發(fā)現(xiàn)有絮狀沉淀物出現(xiàn),該如何處理?
血清中沉淀物的出現(xiàn)有許多原因,但zui普遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性造成的;而血纖維蛋白在血清解凍后,也會(huì)存在于血清中,亦是造成血清沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物,并不影響血清本身的質(zhì)量。
 若您欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無(wú)菌離心管中,以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾。我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因?yàn)樗赡軙?huì)阻塞您的過濾膜。

5.什么事熱滅活?有必要做熱滅活嗎?
 一般以56℃,30分鐘來(lái)處理已解凍的血清,因?yàn)榇思訜岵襟E,可以使補(bǔ)體去活性,而補(bǔ)體所參與的反應(yīng)有:溶細(xì)胞活性,平滑肌的收縮,肥大細(xì)胞和血小板組胺的釋放,增強(qiáng)吞噬作用,淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞的趨化和激活。
 實(shí)驗(yàn)顯示,經(jīng)過正確處理的熱滅活血清,對(duì)大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的。經(jīng)過處理的血清對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)只有微小的促進(jìn),或*沒有任何作用,甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量,而造成細(xì)胞生長(zhǎng)速率的降低。
 而經(jīng)過熱處理的血清,沉淀物的形成會(huì)顯著的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點(diǎn)”,常常會(huì)讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環(huán)境中,又會(huì)使此沉淀物更增多,使研究者認(rèn)為是微生物的分裂擴(kuò)增。
 若非必須,可以不需要做熱滅活這一步,更確保血清的質(zhì)量!


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