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ELISA試劑盒操作技巧以及操作步驟

2024-08-08 [1524]

想要得出正確結(jié)論我們就必須嚴(yán)格按照要求來進(jìn)行實(shí)驗(yàn)操作,尤其是相關(guān)注意事項(xiàng)。接下來為大家說一下ELISA試劑盒操作注意事項(xiàng)。

ELISA試劑盒操作技巧:

1.操作前應(yīng)對試驗(yàn)的物理參數(shù)有充分的了解,如環(huán)境溫度(保持在18 C~25℃)、反響孵育溫度和孵育時(shí)刻、洗刷的次數(shù)等,要先檢查水育箱溫度,ELISA試劑盒是否符合要求。

2.正確運(yùn)用加樣器加樣器應(yīng)垂直加入標(biāo)本或試劑,避免刮擦包被板底部。加樣過程中避免液體外濺,血清殘留在反響孔壁上,加樣器吸頭要清洗潔凈,避免污染,加樣次序要與說明書共同,否則可導(dǎo)致成果錯(cuò)誤,試驗(yàn)重復(fù)性差。

3.手工洗板加洗液時(shí)沖擊力不要太大,洗刷次數(shù)不要超越說明書引薦的洗刷次數(shù),洗液在反響孑L內(nèi)停留的時(shí)刻不宜太長。不要使洗液在孑L間竄流,形成孔問污染,導(dǎo)致假陰性或假陽性。

4.要確保加液量共同 咱們在運(yùn)用時(shí)感覺滴瓶加液不如加樣器好,滴瓶不易控制加液量禁絕,形成顯色不統(tǒng)一,判別錯(cuò)誤。

5.顯色液量不可過多 加樣的工作環(huán)境不能處于陽光直射的環(huán)境下,加顯色系統(tǒng)后要避光反響,顯色液量不能過多,以免顯色過強(qiáng)。

ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)操作步驟:

1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。

4.請每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計(jì)算時(shí)請*后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

6.底物請避光保存。

7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

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