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倉(cāng)鼠ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線的技術(shù)解答內(nèi)容

2024-10-11 [806]

      在倉(cāng)鼠ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中比較常用的一種分析方法。標(biāo)準(zhǔn)曲線做的好與壞會(huì)直接影響到實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,甚至是關(guān)系到實(shí)驗(yàn)的成敗。那么在倉(cāng)鼠ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中,這一方面該如何處理呢?標(biāo)準(zhǔn)曲線法也稱(chēng)為外標(biāo)法或直接比較法,是一種簡(jiǎn)便、快速的定量方法,

1.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品的標(biāo)準(zhǔn)濃度范圍要有一個(gè)比較大的跨度,并且要能涵蓋你所要檢測(cè)實(shí)驗(yàn)樣品的濃度,即樣品的濃度要在標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度范圍之內(nèi),包括上限和下限。而對(duì)于呈S型的標(biāo)準(zhǔn)曲線,盡量要使實(shí)驗(yàn)樣品的濃度在中間坡度*陡段,即曲線幾乎成直線的范圍內(nèi)。

2.倉(cāng)鼠ELISA試劑盒采用倍比稀釋法配制標(biāo)準(zhǔn)曲線中的標(biāo)準(zhǔn)樣品濃度,這樣就能夠保證標(biāo)準(zhǔn)樣品的濃度不會(huì)出現(xiàn)較大的偏離。

3.樣品的濃度等指標(biāo)是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出來(lái)的,所以首先要把做標(biāo)準(zhǔn)曲線看作是比做正式實(shí)驗(yàn)還要重要的一件事,否則后面的實(shí)驗(yàn)結(jié)果無(wú)從談起。

4.做出的標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)因?qū)嶒?yàn)要求不同而有所變動(dòng),但一般來(lái)說(shuō),相關(guān)系數(shù)R至少要大于0.98,對(duì)于有些實(shí)驗(yàn),至少要0.99甚至是0.999。

5.倉(cāng)鼠ELISA試劑盒檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)樣品時(shí),應(yīng)按濃度遞增順序進(jìn)行,以減少高濃度對(duì)低濃度的影響,提高準(zhǔn)確性。

6.標(biāo)準(zhǔn)曲線的樣品數(shù)一般為7個(gè)點(diǎn),但至少要保證有5個(gè)點(diǎn)。

標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度得到后,可通過(guò)計(jì)算器、Excell或SPSS統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行繪制,并得到相關(guān)的回歸方程(即計(jì)算公式)和相關(guān)系數(shù)(回歸系數(shù))。


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