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小鼠抗利尿激素(ADH) ELISA 試劑盒使用說明書

2013-10-17 [1963]

小鼠抗利尿激素(ADH) ELISA 試劑盒使用說明書
1.加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100ul,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn) 品或待測樣品100ul,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2.棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液100ul(取1ul檢測溶液A加99ul 檢測稀釋液A的
比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3.溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350ul/每孔,甩干。
4.每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液)100ul,37℃,60分鐘。
小鼠抗利尿激素(ADH) ELISA 試劑盒使用說明書
5.溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350ul/每孔,甩干。
6.依序每孔加底物溶液90ul,37℃避光顯色(30分鐘以內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有 明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7.依序每孔加終止溶液50ul,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn))。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底 物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8.用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行 檢測。
小鼠抗利尿激素(ADH) ELISA 試劑盒使用說明書
注:1.每次實(shí)驗(yàn)留一孔作為空白調(diào)零孔,該孔不加任何試劑,只是zui后加底物液及2NH2SO4。 測量時(shí)先用此孔調(diào)OD值至零。
2.為防止樣品蒸發(fā),試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標(biāo)板加上蓋或覆膜。
3. 未使用完的酶標(biāo)板或者試劑,請于2-8℃保存。標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液A工作液、檢測溶液B 工作液請依
據(jù)所需的量配置使用。請勿重復(fù)使用已稀釋過的標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液A工作液或檢測溶液B工作液。
4. 建議檢測樣品時(shí)均設(shè)雙孔測定,以保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。
 

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