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ELISA試劑盒實驗檢測影響因素

2014-04-30 [858]

ELISA試劑盒是目前檢驗科常用的免疫學(xué)檢測方法之一,其操作簡單,無須特殊設(shè)備,使其在各級醫(yī)院都有應(yīng)用。
但是,如果忽視了影響其結(jié)果的因素,難免會造成假陰性或假陽性,因此,了解影響實驗的因素,減少差錯事故的發(fā)生是極其必要的。
1實驗室操作人員的素質(zhì)因素
實驗室人員的素質(zhì)主要包括五個方面:思想素質(zhì)、文化素質(zhì)、技術(shù)素質(zhì)、心理素質(zhì)、身體素質(zhì)。首先應(yīng)具備一個良好的思想素質(zhì),因為我們的服務(wù)對象是人,我們的道德水平直接關(guān)系到人們的健康和生命安危,如果馬馬虎虎。三心二意,難免會有差錯事故發(fā)生,我們應(yīng)該熱愛專業(yè),耐心細(xì)致。在工作中如標(biāo)本混淆、張冠李戴、報告單發(fā)錯等都有可能造成嚴(yán)重后果;其次文化素質(zhì)和技術(shù)素質(zhì),我們要熟練掌握本專業(yè)的基本理論和基本技術(shù),認(rèn)真學(xué)習(xí)新理論新知識,努力提高自己的業(yè)務(wù)水平,創(chuàng)造一個能夠勝任本職工作的技術(shù)平臺。良好的心理素質(zhì)就是要勇于面對工作生活中的挫折,在繁忙工作中,有條不紊,冷靜沉著的處理有關(guān)事務(wù)。人員素質(zhì)問題是影響檢驗結(jié)果的首要因素。
2 ELISA試劑盒標(biāo)本處理因素
實驗室人員收到標(biāo)本后應(yīng)認(rèn)真查對,對不符合要求的標(biāo)本和申請單要拘收,合格標(biāo)本要及時分離血清,避免溶血,提取血清時不應(yīng)混有大量纖維蛋白或細(xì)胞成分。對不能及時檢測的標(biāo)本要妥善保存于4℃冰箱,做好原始記錄,標(biāo)本管上標(biāo)上待檢者姓名、日期。從冰箱取出的標(biāo)本要預(yù)溫至室溫,對冰凍的樣品要融化好,并充分混勻再用。
3 操作過程的影響因素
3.1 操作前應(yīng)對實驗的物理參數(shù)有充分的了解,如環(huán)境溫度(保持在18 C~25℃)、反應(yīng)孵育溫度和孵育時間、洗滌的次數(shù)等,要先查看水育箱溫度,是否符合要求。
3.2 正確使用加樣器加樣器應(yīng)垂直加入標(biāo)本或試劑,避免刮擦包被板底部。加樣過程中避免液體外濺,血清殘留在反應(yīng)孔壁上,加樣器吸頭要清洗干凈,避免污染,加樣次序要與說明書一致,否則可導(dǎo)致結(jié)果錯誤,實驗重復(fù)性差。
3.3 手工洗板加洗液時沖擊力不要太大,洗滌次數(shù)不要超過說明書推薦的洗滌次數(shù),洗液在反應(yīng)孑L內(nèi)滯留的時間不宜太長。不要使洗液在孑L間竄流,造成孔問污染,導(dǎo)致假陰性或假陽性。
3.4 要保證加液量一致 我們在使用時感覺滴瓶加液不如加樣器好,滴瓶不易控制加液量不準(zhǔn),造成顯色不統(tǒng)一,判斷錯誤。
3.5 顯色液量不可過多 加樣的工作環(huán)境不能處于陽光直射的環(huán)境下,加顯色系統(tǒng)后要避光反應(yīng),顯色液量不能過多,以免顯色過強(qiáng)。
4 ELISA試劑盒的影響因素
應(yīng)選用有國家批準(zhǔn)文號,質(zhì)量靠得住的產(chǎn)品,不能圖便宜,忽視質(zhì)量保證。試劑應(yīng)妥善保存于4℃冰箱內(nèi),在使用時先平衡至室溫,不同批號的試劑組分不宜交叉使用。試劑開啟后要在一周內(nèi)用完,剩余的試劑下次用時應(yīng)先檢查是否變質(zhì),,顯色劑如被污染變色將造成全部顯色,導(dǎo)致錯誤結(jié)果。
過期的試劑不宜再用,若別無選擇,應(yīng)做好雙份質(zhì)控品的監(jiān)測,確保結(jié)果的可靠性。
5 采取措施,避免差錯事故的發(fā)生

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