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關(guān)于ELISA試劑盒實驗質(zhì)量控制

2014-07-04 [925]

實驗室質(zhì)量控制進入一個新的階段--全面質(zhì)量治理,推行Good Laboratory Parctice(簡稱GLP)。從1949年美國College of American Pathologists(簡稱CAP)首先開始研究臨床實驗室室內(nèi)質(zhì)量控制(簡稱質(zhì)控)問題,ELISA試劑盒美國學者Levery和Jenning于1950年發(fā)表*篇關(guān)于使用質(zhì)控圖的實驗室室內(nèi)質(zhì)控,臨床檢修實驗室的室內(nèi)質(zhì)控工作正式拉序幕。全面質(zhì)量治理的宗旨在于預(yù)防差錯的產(chǎn)生,質(zhì)控圖的統(tǒng)計學質(zhì)控的目的是檢出差錯,統(tǒng)計學的實驗室室內(nèi)質(zhì)控是全面質(zhì)量治理中的一個重要環(huán)節(jié)。衛(wèi)生部臨床檢修中央免疫質(zhì)控室從1988年開始在全國范圍內(nèi)開展乙肝標志物檢修的質(zhì)量評價流動,一直采用這一套質(zhì)量評價方法,并在實踐中不斷實踐、進步和完善,但愿能找出一條適合中國國情的,行之有效的質(zhì)量治理的道路。由于ELISA試劑盒是目前臨床上zui常用的一種免疫學檢修方法,就以ELISA檢修為例,討論下問題。
一、質(zhì)量控制(Quaility Control,Q.C)
質(zhì)量控制是監(jiān)視全過程,排除誤差,防止變化,維持標準化現(xiàn)狀的一個管理過程。這一過程是通過一個反饋環(huán)路進行的。
(1)確定控制的對象;
(2)規(guī)定控制對象的標準(預(yù)期值);
(3)制定或選擇控制方法和手段;
(4)測量實際數(shù)據(jù);
(5)比較或較對實際數(shù)據(jù)與預(yù)期值之間的差異,并說明產(chǎn)生這一差異的原因。超出預(yù)定誤差范圍,報警系發(fā)出信號,反饋通道中斷。
(6)采取行動,解決差異?;謴?fù)原狀(原標準狀態(tài))的手段發(fā)揮作用。質(zhì)量控制主要采用質(zhì)控圖進行。質(zhì)控圖是把某一檢驗的性能數(shù)據(jù)與所計算出來的預(yù)期的"控制限"進行比較的圖。這種性能數(shù)據(jù)是在按規(guī)程正常進行時,按時間順序而抽選出來的,其目的是檢測檢驗過程中變異的"可追查"性原因。"可追逆"性的誤差原因,是指除去隨機誤差以外的其他原因。"控制限"是通過統(tǒng)計計算出來的。 
二、誤差
實驗誤差分為三種:系統(tǒng)誤差、隨機誤差和過失誤差。系統(tǒng)誤差是指一系列測定結(jié)果與真值或靶值存在有同一傾向的誤差,有明顯的規(guī)律性,ELISA試劑盒可在一定條件下重復(fù)出現(xiàn),是可以通過質(zhì)控預(yù)防和校正的。隨機誤差又稱偶然誤差,是一種偶然的、未能預(yù)料到的誤差,是難以避免和校正的誤差。檢驗工作中隨機誤差的分布符合正態(tài)分布規(guī)律。過失誤差是人為的責任誤差。通過加強實驗室管理和開展質(zhì)量控制工作是可以避免的。
三、正態(tài)分布及標準差
ELISA試劑盒試驗中,檢驗同一樣本達20次以上時,就會發(fā)現(xiàn)這組數(shù)據(jù)(指測定結(jié)果的吸光值)分布在均值兩側(cè),大部分集中在均值附近。如果以測定值為橫坐標,以出現(xiàn)的頻率為縱坐標作圖,就可繪出一個呈鐘形的曲線圖。鐘頂處為均值,其他值以均值為中心對稱分布,這就是正態(tài)分布。正態(tài)曲線以下的面積稱概率,常用樣本的均數(shù)(X)和標準差(SD)來表示,其計算方法如下:均值、標準差和概率的關(guān)系如下:
 X±1SD,概率0.68 X±2SD,概率0.95 X±3SD,概率0.99換言之,當ELSIA檢測同一樣本達一定次數(shù)后所得的一組數(shù)據(jù),其中靠近均值(X)的±1SD范圍內(nèi)的數(shù)據(jù),ELISA試劑盒占該組數(shù)據(jù)的68%,在X±2SD范圍內(nèi)分布的數(shù)據(jù)占總體的95%,在X±3SD范圍內(nèi)分布的數(shù)據(jù)占總體的99%。當我們要求檢驗結(jié)果在X±2SD范圍內(nèi)為合格時,將有95%的數(shù)據(jù)可能合格。

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