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關(guān)于ELISA試劑盒原理實(shí)驗(yàn)條件和技術(shù)要點(diǎn)

2014-07-28 [928]

ELISA試劑盒原理實(shí)驗(yàn)條件和技術(shù)要點(diǎn)在應(yīng)用ELISA時(shí),首先要清楚下面內(nèi)容:1,是檢測(cè)抗體還是抗原?2,檢測(cè)的結(jié)果是定性還是定量?3,是否需要檢測(cè)特異抗體的類型?4,所用抗體/單克隆抗體的親和力怎樣?(1)檢測(cè)抗原  zui常用于檢測(cè)抗原的方法是非競爭性的雙抗體夾心法,其次是競爭法。但競爭法在具體實(shí)驗(yàn)中有些困難,特別是檢測(cè)微生物的抗原,因?yàn)樾枰獦?biāo)記抗原,這對(duì)于某些抗原是很難做到的,甚至是不可能的。另外在競爭法中,酶標(biāo)記的抗原與標(biāo)本直接混合在一起,許多標(biāo)本中含有酶抑制劑或蛋白A樣物質(zhì),可影響ELISA的結(jié)果。(2)檢測(cè)抗體  檢測(cè)抗體種類常用的方法是檢測(cè)抗體種類的捕獲法,這個(gè)方法常用于檢測(cè)特異性IgG、IgA和IgM.。這個(gè)方法的*步是捕獲所需要檢測(cè)的一個(gè)種類的抗體,接下來是檢測(cè)捕獲的抗體是否是特異性抗原的抗體。間接ELISA試劑盒在檢測(cè)IgG時(shí)比較簡單,但不適用于檢測(cè)其他種類的抗體,因?yàn)檠逯腥绻刑禺怚gG存在將與IgM或IgA等競爭結(jié)合抗原。

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