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魚(yú)細(xì)胞凋亡因子(Fas)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說(shuō)明書(shū)

2015-09-07 [1164]

魚(yú)細(xì)胞凋亡因子(Fas)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說(shuō)明書(shū)
實(shí)驗(yàn)原理
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中魚(yú)細(xì)胞凋亡因子 (Fas)亡因子(Fas)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入細(xì)胞凋亡因子(Fas),再與  HRP 標(biāo)記的細(xì)胞凋亡因子(Fas)體,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)用純化的魚(yú)細(xì)胞凋過(guò)*洗滌后加底物 TMB顯色。TMB在H酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的。顏色的深淺和樣品中的細(xì)胞凋亡因子(Fas)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在  450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中魚(yú)細(xì)胞亡因子(Fas)濃度。
試劑盒組成標(biāo)本要
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能
馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因   NaN3抑制辣根過(guò)(HRP)活性。
操作步驟
1.  標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo), OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與  OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的 O值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。

魚(yú)細(xì)胞凋亡因子(Fas)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說(shuō)明書(shū)注意事項(xiàng)
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡 15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未
用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會(huì)有析出,稀釋時(shí)可在浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間
控制在 5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本  OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的 OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后以總稀釋倍。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉
6.底物請(qǐng)避光保存。
7.嚴(yán)格按照說(shuō)明書(shū)的操作進(jìn)行,試驗(yàn)
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
魚(yú)細(xì)胞凋亡因子(Fas)酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說(shuō)明書(shū)保存條件及有效期
1.試劑盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6個(gè)月

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