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實(shí)驗(yàn)室日常小技巧集錦
2010-3-25
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平時(shí)在實(shí)驗(yàn)室zui常聽到的一句話就是“今天某某試驗(yàn)沒做好是為什么?今天某某試驗(yàn)沒出結(jié)果是什么原因?今天某某試驗(yàn)為什么會(huì)是這樣的呢?”等等。然后仔細(xì)一查找原因,往往是由于操作上面的不認(rèn)真,或是一些小小的細(xì)節(jié)沒有注意到。以下是集各路朋友的一些經(jīng)驗(yàn),與大家分享:1跑page膠的時(shí)候,小電壓跑會(huì)避免高電壓產(chǎn)生的熱量爾導(dǎo)致的膠層變形。低電壓泳道會(huì)比大電壓泳道跑的直一些,且分離效果更高,有利于分子量相差不大的蛋白分離。2.提取質(zhì)粒的時(shí)候,zui后一步的酒精揮發(fā)很關(guān)鍵,基本上是其后續(xù)的酶切...
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ELISA中的試劑-酶的底物
2010-3-24
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ELISA中的試劑-酶的底物酶的底物3.3.1HRP的底物HRP催化過氧化物的氧化反應(yīng),代表性的過氧化物為H2O2,其反應(yīng)式如下:DH2+H2O2D+H2O上式中,DH2為供氧體,H2O2為受氫體。在ELISA中,DH2一般為無色化合物,經(jīng)酶作用后成為有色的產(chǎn)物,以便作比色測(cè)定。常用的供氫體有鄰苯二胺(O-phenylenediamine,OPD)、四甲基聯(lián)苯胺(3,3\\',5,5\\'-tetramethylbenzidine,TMB)和ABTS[2,2\\'-azino...
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蛋白質(zhì)提取方法
2010-3-23
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蛋白質(zhì)提取方法-------列舉10種方法一、植物組織蛋白質(zhì)提取方法(summer)1、根據(jù)樣品重量(1g樣品加入3.5ml提取液,可根據(jù)材料不同適當(dāng)加入),準(zhǔn)備提取液放在冰上。2、把樣品放在研缽中用液氮研磨,研磨后加入提取液中在冰上靜置(3-4小時(shí))。3、用離心機(jī)離心8000rpm40min4℃或11100rpm20min4℃4、提取上清夜,樣品制備完成。蛋白質(zhì)提取液:300ml1、1Mtris-HCl(PH8)45ml2、甘油(Glycerol)75ml3、聚乙烯吡咯烷酮...
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巴西三位一體的生物柴油戰(zhàn)略
2010-3-22
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有害氣體排放超標(biāo)、氣候變暖、石油價(jià)格居高不下、可再生資源日漸匱乏……面對(duì)一系列生態(tài)難題,人類該如何應(yīng)付?生物柴油正日益成為能源發(fā)展的新選擇。然而,對(duì)于大規(guī)模采用生物柴油這一戰(zhàn)略選擇,究竟利大于弊,還是弊大于利,眾說紛紜。權(quán)衡標(biāo)準(zhǔn)也呈現(xiàn)多樣性:一是商業(yè)標(biāo)準(zhǔn),發(fā)展生物柴油是否經(jīng)濟(jì);二是生態(tài)標(biāo)準(zhǔn),生物柴油是否是對(duì)環(huán)境健康的能源;三是社會(huì)標(biāo)準(zhǔn),即發(fā)展生物柴油是否有利于社會(huì)問題的緩解。巴西是世界大規(guī)模開發(fā)生物柴油zui早的國家,巴西發(fā)展生物柴油,實(shí)現(xiàn)“能源—環(huán)境—社會(huì)”三位一體的發(fā)展生...
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酶免疫測(cè)定的酶—大分子蛋白結(jié)合物的制備
2010-1-31
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酶免疫測(cè)定的酶—大分子蛋白結(jié)合物的制備酶結(jié)合物可以說是酶免疫測(cè)定試劑盒的核心組成部分。通常酶免疫測(cè)定試劑盒的有效使用期限即是根據(jù)酶結(jié)合物的穩(wěn)定性而定的。因?yàn)樵诿该庖邷y(cè)定試劑盒中,zui易受外環(huán)境影響的組成試劑即是酶結(jié)合物。此外,酶結(jié)合物的質(zhì)量亦是影響試劑盒質(zhì)量的很重要的因素之一,可見酶結(jié)合物的制備對(duì)于酶免疫測(cè)定來說,是非常關(guān)鍵的一個(gè)環(huán)節(jié)。酶—抗體(或其他大分子蛋白)結(jié)合物是酶免疫測(cè)定的有機(jī)組成部分,也是其測(cè)定基礎(chǔ)之所在。通常,酶結(jié)合物(酶標(biāo)抗體或抗原)一般均是通過化學(xué)交聯(lián)而得...
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酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定的操作要點(diǎn)
2010-1-31
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酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定的操作要點(diǎn)1標(biāo)本的采取和保存可用作ELISA測(cè)定的標(biāo)本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標(biāo)本以測(cè)定其中某種抗體或抗原成份。有些標(biāo)本可直接進(jìn)行測(cè)定(如血清、尿液),有些則需經(jīng)預(yù)處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測(cè)均以血清為標(biāo)本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外,其他成份均同等于血清。制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑,而血清標(biāo)本只要待血清自然凝固、血塊收縮后即可取得。除特殊情況外,在醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中均以血清作為檢測(cè)標(biāo)本。在E...